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1材料與方法
1.1供試材料供試魚類:草魚魚苗,平均體質(zhì)量(0.20±0.01)g·尾-1;鰱魚魚苗,平均體質(zhì)量(0.49±0.01)g·尾-1;鯽魚魚苗,平均體質(zhì)量(0.52±0.01)g·尾-1。這3種魚苗均購自福建省福州市閩侯南嶼五溪魚苗場。供試用水:試驗容器為圓柱形玻璃缸(Φ=25cm×25cm),裝有經(jīng)過48h充分曝氣的自來水,溫度24~26℃,pH6.8~7.2,溶解氧保持在5.8mg·L-1以上,保持自然光照。
1.2供試藥劑860g·L-1二甲胺鹽水劑,江蘇常州永泰豐化工有限公司生產(chǎn)。
1.3供試方法
1.3.1預(yù)試驗采用半靜態(tài)法進(jìn)行測試(蔡道基,1999)。草魚、鰱魚、鯽魚等供試魚苗在試驗前要馴養(yǎng)10d左右,馴養(yǎng)期間自然死亡率保持在5%以下,選擇健康、反應(yīng)靈敏、大小基本一致的魚苗用于試驗。試驗前24h停止喂食。每個魚缸中加入5L藥液,分別放入供試魚苗10尾。試驗開始6h后,即時觀察并記錄供試魚苗的行為、中毒癥狀、死亡尾數(shù)等,此后分別記錄24、48、72和96h的死亡尾數(shù)。用毛筆多次輕觸魚苗尾部,若無任何反應(yīng),則視為死亡,并及時撈出死亡個體。試驗期間不投喂餌料。每天測定并記錄試液溫度、pH及溶解氧濃度。每24h更換1次藥液。
1.3.2急性毒性試驗根據(jù)預(yù)試驗分別確定二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚的24h100%致死濃度(LC100)和96h最大耐受濃度(NOEC),然后在此范圍內(nèi)設(shè)6個濃度梯度和1個清水對照組,每個處理重復(fù)3次。二甲胺鹽的供試濃度:草魚:1.4數(shù)據(jù)處理采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計分析,計算出線性回歸方程,并分別求出二甲胺鹽處理后24、48、72和96h的LC50值以及95%置信區(qū)間,確定二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚的急性毒性等級。然后用經(jīng)驗公式Sc=96hLC50×0.1計算出二甲胺鹽的安全濃度(國家環(huán)境保護(hù)局,1993)。毒性評價根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準(zhǔn)則》,以96hLC50值判斷,LC50≤0.1mg·L-1為劇毒,0.1mg·L-1<LC50≤1.0mg·L-1為高毒,1.0mg·L-1<LC50≤10mg·L-1為中毒,LC50>10mg·L-1為低毒(國家環(huán)境保護(hù)總局南京環(huán)境科學(xué)研究所,1990)。
2結(jié)果與分析
2.1草魚、鰱魚和鯽魚對二甲胺鹽中毒癥狀試驗開始時,草魚、鰱魚和鯽魚3種供試魚苗基本能適應(yīng)藥液環(huán)境,可以正常游動,但隨著在藥液中暴露時間的延長,供試魚苗逐漸出現(xiàn)中毒癥狀和死亡現(xiàn)象。6h后,各藥液處理組的供試魚苗均出現(xiàn)游動速度增大和呼吸頻率加快的現(xiàn)象,而清水對照組未出現(xiàn)中毒癥狀。高濃度藥液處理組較早出現(xiàn)異常反應(yīng),供試魚苗游動時,身體平衡能力明顯受到影響,在水中出現(xiàn)側(cè)翻現(xiàn)象;此后,供試魚苗逐漸出現(xiàn)游動緩慢、魚體失去平衡、翻身打旋、抽搐痙攣等中毒現(xiàn)象,對外界的刺激反應(yīng)減弱,最后完全失去反應(yīng)直至死亡。
2.2二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚的急性毒性二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚的急性毒性測定結(jié)果。結(jié)果表明,隨著暴露時間的延長,二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚的LC50值逐漸減小,說明其對草魚、鰱魚和鯽魚的急性毒性逐漸提高。隨著二甲胺鹽藥劑濃度的增大,草魚、鰱魚和鯽魚的死亡率逐漸上升,呈現(xiàn)明顯的劑量—效應(yīng)關(guān)系。
2.3二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚的安全濃度二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚的96hLC50值分別為369.27、339.20和438.47mg·L-1。根據(jù)我國農(nóng)藥對魚類毒性的分級標(biāo)準(zhǔn),二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚屬低毒農(nóng)藥。二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚的安全濃度分別為36.93、33.92和43.85mg·L-1。
3討論
不同除草劑對魚類的毒性不同。驃馬對草魚為高毒農(nóng)藥,草魚在經(jīng)過除草劑驃馬染毒24h后,基因組DNA發(fā)生了變化(陳家長等,2006)。不同種魚類對不同除草劑的耐受性也不同,鯉魚Cypri-nuscarpio對使它隆、禾田凈、禾大壯、苯達(dá)松、丁草胺等5種除草劑的耐受力較強(qiáng),白鯽和草魚則較敏感(張中俊等,1990)。本研究結(jié)果表明,二甲胺鹽對草魚、鰱魚和鯽魚均屬低毒農(nóng)藥。據(jù)報道,以86%二甲胺鹽水劑400~600倍液(215~143.33mg·L-1)2次施藥防除河道喜旱蓮子草,速效性好,持效期長,藥后1、3、5、7d,各魚種吃食正常,未發(fā)生活動異常和死魚現(xiàn)象(陸云梅和荊衛(wèi)鋒,2009),說明二甲胺鹽在田間使用過程中,有效的使用濃度不會對魚類產(chǎn)生明顯影響,與本研究結(jié)果一致。試驗過程中發(fā)現(xiàn),草魚、鰱魚和鯽魚在較高濃度二甲胺鹽處理下,產(chǎn)生鰓發(fā)紅、魚眼渾濁等中毒現(xiàn)象。
因此,在使用二甲胺鹽防治水生雜草時必須在安全濃度下選擇適當(dāng)?shù)氖褂脻舛?同時應(yīng)盡量減少二甲胺鹽在水體中的使用,避免其進(jìn)入魚類養(yǎng)殖區(qū)、產(chǎn)卵場、越冬場、仔稚幼魚的索餌場等敏感水區(qū)及水體保護(hù)區(qū)。除草劑二氯喹啉酸對湘云鯽的細(xì)胞致毒作用,表現(xiàn)為對其鰓、肝臟中Na+-K+-ATPase和Mg+-AT-Pase的活性產(chǎn)生抑制作用,從而影響湘云鯽的正常生理機(jī)能(宋穩(wěn)成等,2002)。Cu2+對鳙魚Hypoph-thalmichthysnobilis的胚胎發(fā)育有明顯的延緩作用,Cd2+溶液對鳙魚胚胎的致毒作用也很明顯,可導(dǎo)致魚仔畸型或死亡(葉素蘭和余治平,2009)。二甲胺鹽可顯著降低蓮草直胸跳甲Agasicleshy-grophila成蟲的取食量、卵孵化率、幼蟲存活率和蛹羽化率等(傅建煒等,2012)。因此,二甲胺鹽在水體中的使用是否會對草魚、鰱魚和鯽魚產(chǎn)生細(xì)胞毒性作用,是否會對其生長發(fā)育過程產(chǎn)生影響,還需要進(jìn)一步研究和評價。
作者:傅建煒李建宇史夢竹游泳魏單位:輝福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院