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細(xì)胞生物學(xué)范文第1篇

【關(guān)鍵詞】 細(xì)胞生物學(xué) 教學(xué)改革

【中圖分類號】 G642 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 A 【文章編號】 1006-5962（2013）01（a）-0121-01

細(xì)胞生物學(xué)是現(xiàn)代生物學(xué)中進(jìn)展較快的學(xué)科之一。由于技術(shù)的革新和研究方法的改進(jìn)，知識更新的速度較快。盡管該課程具有較好的基礎(chǔ)，但由于學(xué)科發(fā)展迅速，課程體系、教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)手段已與現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展不相適應(yīng)。我們本著全面提高教學(xué)質(zhì)量，不斷提高人才培養(yǎng)的能力和水平的方針，著重對細(xì)胞生物學(xué)課程的教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)手段、教學(xué)方法、實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ降确矫孢M(jìn)行改革，在繼承傳統(tǒng)教學(xué)模式優(yōu)點(diǎn)的同時(shí)，積極引進(jìn)和采納先進(jìn)的教學(xué)方法，力求克服傳統(tǒng)教學(xué)中的弊端，實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)教學(xué)模式和新型教學(xué)模式的有機(jī)結(jié)合。以期培養(yǎng)出符合社會需要的高素質(zhì)創(chuàng)新性人才。

1 教學(xué)內(nèi)容改革

細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展極為迅速，特別體現(xiàn)在細(xì)胞增殖、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面。本課程注重聯(lián)系學(xué)科的前沿和熱點(diǎn)，講述較先進(jìn)的科學(xué)結(jié)論，跟蹤國際上最新進(jìn)展，力求在教學(xué)內(nèi)容上反映出最先進(jìn)的科研成果，同時(shí)通過專題介紹，細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)網(wǎng)站，將教學(xué)要求、主要內(nèi)容、習(xí)題、相關(guān)科研領(lǐng)域、前沿進(jìn)展等及時(shí)上網(wǎng)等一系列獨(dú)特的教學(xué)方式，將細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的最新研究成果引入到教學(xué)中，特別是我們正在建設(shè)細(xì)胞增殖與調(diào)控論壇，使得學(xué)生可以隨時(shí)開展教學(xué)和研究討論，實(shí)現(xiàn)知識更新，拓寬了學(xué)生的視野。

2 教學(xué)手段的改革

細(xì)胞生物學(xué)課程具有高度的綜合性、抽象性和復(fù)雜性。因此在教學(xué)中要靈活運(yùn)用多種教學(xué)手段和教學(xué)形式，直觀地再現(xiàn)抽象原理。多媒體技術(shù)在教學(xué)中具有變復(fù)雜為簡明，變抽象為具體，變靜態(tài)為動態(tài)[1]，從而幫助學(xué)生更好地掌握相關(guān)知識的作用。使用多媒體設(shè)備的目的是為了多角度、多方位、多途徑地向?qū)W生傳遞信息[2]，增強(qiáng)課堂教學(xué)的生動性、形象性和科學(xué)性。

3 教學(xué)方法改革

以教學(xué)互動理論為指導(dǎo)，結(jié)合細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)的現(xiàn)狀，將教學(xué)互動模式逐漸引入細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)之中[3]。旨在通過教師與學(xué)生之間的多向交往，調(diào)動師生間的積極心理互動，提高教學(xué)效果。

互聯(lián)網(wǎng)的快速發(fā)展給傳統(tǒng)的教學(xué)帶來巨大的挑戰(zhàn)。當(dāng)前，網(wǎng)絡(luò)成為學(xué)生獲取信息和知識的主要途徑。比起教師照本宣科的傳統(tǒng)教學(xué)模式或讓學(xué)生看了頭疼的PPT課件，上網(wǎng)也就成了很多學(xué)生打發(fā)時(shí)間的共同選擇。針對網(wǎng)絡(luò)時(shí)代學(xué)生學(xué)習(xí)的特點(diǎn)，同時(shí)結(jié)合細(xì)胞生物學(xué)課程自身的特點(diǎn)，我們依托學(xué)校的網(wǎng)絡(luò)課程建設(shè)平臺建設(shè)了細(xì)胞生物學(xué)網(wǎng)絡(luò)課程。本著集知識性和娛樂性與一體的建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)，我們搜集和整理了許多和細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)的軟件、動畫、趣味故事及一些重要理論提出的過程等。如，我們對Ruska于1933年制造了世界上第一臺無法使用的電子顯微鏡（由于沒有解決產(chǎn)熱問題），隨后放棄，繼而又浪子回頭重新立志研制電子顯微鏡并于1938年終于研制出世界上第一臺分辨率為10 nm的商業(yè)電子顯微鏡的過程進(jìn)行介紹。同學(xué)們聽得很認(rèn)真，感觸也頗深。通過電子顯微鏡的研發(fā)過程，同學(xué)們既了解了科學(xué)史，同時(shí)又明白了對于理想和工作必須持之以恒才能有所收獲的道理?？芍^是一舉兩得。

4 實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式改革

實(shí)驗(yàn)教學(xué)注重培養(yǎng)學(xué)生的動手能力、分析解決問題的能力、科研創(chuàng)新能力，對農(nóng)業(yè)院校培養(yǎng)都市型綜合型人才尤為重要。當(dāng)前，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容不斷更新，綜合性、設(shè)計(jì)性，等層次較高的實(shí)驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中所占的比重也越來越大。為適應(yīng)教學(xué)改革的要求，我們逐步改革實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法。

細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的最終目的是在實(shí)驗(yàn)室條件允許時(shí)實(shí)施開放式實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式，即學(xué)生可以根據(jù)自己的興趣或研究課題的需要選擇實(shí)驗(yàn)材料，這樣既可使學(xué)生實(shí)驗(yàn)真正成為研究課題或畢業(yè)論文的一部分，又能使學(xué)生對所學(xué)習(xí)的知識融會貫通，達(dá)到使學(xué)生了解和熟悉科研過程，培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究工作的能力的目的。

目前，已實(shí)現(xiàn)部分實(shí)驗(yàn)藥品的由學(xué)生自己配制。下一步擬主要針對將來想在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域深造的同學(xué)實(shí)施小范圍的開放式實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式，即在基本實(shí)驗(yàn)完成的基礎(chǔ)上，對他們開放實(shí)驗(yàn)室，讓他們根據(jù)自己的興趣以及細(xì)胞生物學(xué)學(xué)科發(fā)展的特點(diǎn)，根據(jù)自己所學(xué)知識自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。在教師指導(dǎo)下修訂實(shí)驗(yàn)方案，完成實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，為下一步的科研奠定基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

[1] 王定琴.多媒體在化學(xué)教學(xué)中的作用.甘肅教育，2012，（18）：71.

細(xì)胞生物學(xué)范文第2篇

關(guān)鍵詞：細(xì)胞生物學(xué)；教學(xué)效果；探索

目前，我國正大力推進(jìn)研究生教育綜合改革，研究生教育已從規(guī)?；l(fā)展全面進(jìn)入以質(zhì)量為核心的內(nèi)涵發(fā)展。重視課程學(xué)習(xí)、提高課程質(zhì)量是保障研究生質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)，也是當(dāng)前研究生教育改革的一個重點(diǎn)。然而，調(diào)查發(fā)現(xiàn)，目前研究生課程教學(xué)普遍存在一些問題，如學(xué)校對教學(xué)不夠重視、教學(xué)內(nèi)容不當(dāng)、教學(xué)手段單一、考核方式不靈活等問題[1]。細(xì)胞生物學(xué)是研究并揭示細(xì)胞基本生命活動規(guī)律的科學(xué)。著名的細(xì)胞生物學(xué)家威爾遜（E.B.Wilson）講到“每一個生物科學(xué)問題的答案都必須在細(xì)胞中尋找”[2]。細(xì)胞研究涉及到生命科學(xué)的各個層次和領(lǐng)域，細(xì)胞生物學(xué)已成為生命科學(xué)的四大基礎(chǔ)學(xué)科之一。目前，各個高校生物學(xué)研究生均開設(shè)有細(xì)胞生物學(xué)課程，但同樣存在以上問題，教學(xué)效果不容樂觀。為了更好地保障和提高研究生細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)質(zhì)量，筆者從課程的教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法和手段、課程考核方法等方面進(jìn)行了一些探索與實(shí)踐，取得了較好的教學(xué)效果。

一優(yōu)化課程內(nèi)容，融入最新科研動態(tài)

知己知彼方能百戰(zhàn)不殆，要想教好細(xì)胞生物學(xué)這門課，必須充分掌握課程及授課對象的特點(diǎn)。研究生理論課的課時(shí)一般較本科生少，更加注重前沿性和綜合性，生源來自不同本科院校，學(xué)生的專業(yè)理論基礎(chǔ)和背景也稍顯參差不齊。細(xì)胞生物學(xué)涉及的內(nèi)容極為廣泛，與多門課程內(nèi)容之間有相互交叉與聯(lián)系。若想在有限的課時(shí)內(nèi)，適應(yīng)不同生源，拓寬學(xué)生的知識面，開闊學(xué)生視野，對提高教學(xué)效果起到事半功倍的效果，必須調(diào)整和優(yōu)化課程內(nèi)容。

（一）調(diào)整課程內(nèi)容，避免重復(fù)和遺漏

細(xì)胞生物學(xué)課程與分子生物學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)等多門課程內(nèi)容之間有交叉[3]。因此，需要各門課程負(fù)責(zé)老師就各自的講授內(nèi)容進(jìn)行研討，確定核心授課內(nèi)容，避免教學(xué)重復(fù)。目前，越來越多的交叉學(xué)科出現(xiàn)并發(fā)揮出重要作用，多學(xué)科交叉融合是高校學(xué)科發(fā)展的必然趨勢。細(xì)胞生物學(xué)的生源也由單純的生物背景轉(zhuǎn)變?yōu)橛缮飳W(xué)、化學(xué)、食品科學(xué)、材料學(xué)等多種背景。為適應(yīng)不同的生源，教師需要充分掌握學(xué)生的專業(yè)基礎(chǔ)。如在開課前設(shè)計(jì)問卷，將課程知識點(diǎn)細(xì)化，每個知識點(diǎn)都分成熟悉、了解、陌生三個級別。統(tǒng)計(jì)出哪些知識點(diǎn)是學(xué)生都熟悉的，可以簡單概括講解甚至忽略，對多數(shù)人只是了解或完全陌生的內(nèi)容需要詳細(xì)或重點(diǎn)講解，從而避免教學(xué)遺漏。

（二）優(yōu)化課程內(nèi)容，增強(qiáng)新穎性

教學(xué)內(nèi)容在很大程度上決定了學(xué)生的知識結(jié)構(gòu)和能力形成，因此，教學(xué)內(nèi)容的新穎性對提高教學(xué)質(zhì)量有重要作用。細(xì)胞生物學(xué)是當(dāng)今發(fā)展最快的基礎(chǔ)學(xué)科之一，知識更新快，信息量增長迅速。教師應(yīng)與時(shí)俱進(jìn)，掌握本學(xué)科的最新發(fā)展動態(tài)，引導(dǎo)學(xué)生關(guān)注、跟蹤科研的發(fā)展動向?？梢赞饤壒逃薪滩模哟笄把仡I(lǐng)域理論、技術(shù)及相關(guān)知識的內(nèi)容比例，以增強(qiáng)課程內(nèi)容的新穎性，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，拓寬眼界，活躍學(xué)生的科研思維。

二豐富教學(xué)手段，引入先進(jìn)教學(xué)方法

傳統(tǒng)的教學(xué)模式是講授式，以教為中心，注重知識的傳輸，忽視了學(xué)生個性和能力的培養(yǎng)。為了讓學(xué)生能夠更加積極、主動地參與到教學(xué)過程中，應(yīng)采用多樣化的教學(xué)方法，注重啟發(fā)式、研究式、討論式等多種教學(xué)手段的綜合運(yùn)用。

（一）進(jìn)行專題學(xué)習(xí)

專題學(xué)習(xí)就是結(jié)合該學(xué)科發(fā)展現(xiàn)狀，精選具有代表性的關(guān)鍵內(nèi)容，就某項(xiàng)專題進(jìn)行學(xué)習(xí)，引導(dǎo)學(xué)生討論與思考，讓學(xué)生對該問題有更全面更深入認(rèn)識的教學(xué)方式。細(xì)胞生物學(xué)課程專題的選擇可參考國內(nèi)或國際細(xì)胞生物學(xué)會議論文集。也可以是當(dāng)前領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題，如誘導(dǎo)多能干細(xì)胞是十年來細(xì)胞研究的一個熱點(diǎn)，在學(xué)習(xí)細(xì)胞分化這部分內(nèi)容時(shí)，即可選擇多能干細(xì)胞的誘導(dǎo)這一專題，既有干細(xì)胞的內(nèi)容與教學(xué)內(nèi)容相連貫，又涉及到新的干細(xì)胞類型作為課程內(nèi)容的延伸。

（二）采用雙語教學(xué)

隨著國際化交流的日益增多，開展雙語教學(xué)已成為必然趨勢，教育部也提出了在高校開展雙語教學(xué)的要求，研究生階段開展雙語教學(xué)尤為需要。近年來，細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展迅猛，重大成果不斷涌現(xiàn)。然而，據(jù)統(tǒng)計(jì)細(xì)胞生物學(xué)90%以上的新發(fā)現(xiàn)都以英語方式報(bào)道、傳播。中文版教材存在知識滯后性及新專業(yè)術(shù)語定義模糊等弊端。為了讓研究生準(zhǔn)確把握細(xì)胞生物學(xué)的前沿知識，實(shí)行雙語教學(xué)勢在必行。實(shí)行雙語教學(xué)對教師素質(zhì)有很高要求，青年教師一般具備較好的英語應(yīng)用能力，豐富的知識技能儲備以及充沛的精力保證，可作為重點(diǎn)對象進(jìn)行培養(yǎng)。在進(jìn)行雙語教學(xué)的過程中，教師應(yīng)注意教材的選擇要合適、采取滲透式雙語教學(xué)方式，循序漸進(jìn)，并應(yīng)加強(qiáng)與學(xué)生溝通，重視學(xué)生反饋，以提高學(xué)生專業(yè)英語水平，提高學(xué)生興趣為目的，同時(shí)，又不能給學(xué)生帶來過多的學(xué)業(yè)壓力。

三完善考評體系，建立綜合考核機(jī)制

傳統(tǒng)的考評即為試卷考試，難以真正反映學(xué)生的學(xué)習(xí)態(tài)度，無法充分調(diào)動學(xué)生的積極性。為了讓所有學(xué)生真正做到主動學(xué)習(xí)，參與到整個教學(xué)過程當(dāng)中，必須摒棄傳統(tǒng)的單一考核方式，建立新的課程綜合考核體系。如實(shí)行注重多元化的考核方式，將課程考核分為3部分，分別為理論考核（占30%）、文獻(xiàn)學(xué)習(xí)討論（占30%）、專題匯報(bào)（占40%）。其中每部分都側(cè)重對學(xué)生綜合能力的測評。即使在理論考核部分，除了涉及基礎(chǔ)理論知識，還要涉及最新的研究進(jìn)展和科研動態(tài)，以及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)環(huán)節(jié)，以綜合考察學(xué)生學(xué)習(xí)的深度、廣度及靈活運(yùn)用能力。這樣的命題方法改變了傳統(tǒng)死記硬背的考試方式，可防止學(xué)時(shí)考前臨陣磨槍，臨時(shí)抱佛腳，督促學(xué)生注重加強(qiáng)平時(shí)的理論學(xué)習(xí)。文獻(xiàn)學(xué)習(xí)方面，要求學(xué)生之間、師生之間進(jìn)行互動交流，會促使學(xué)生積極思考，能夠提出問題并找到解決問題的方法，相應(yīng)地學(xué)生就必須查閱大量相關(guān)文獻(xiàn)，可考查學(xué)生檢索文獻(xiàn)和匯報(bào)文獻(xiàn)的能力。專題匯報(bào)部分，要求學(xué)生凝練出一個科學(xué)問題，圍繞專題背景、熱點(diǎn)、難點(diǎn)、常規(guī)及最新研究技術(shù)方法等展開講述。通過學(xué)生的發(fā)言情況，了解學(xué)生對專題知識的掌握情況及學(xué)生對專題活動的參與程度。

四重視教學(xué)能力，提高教師教學(xué)水平

近年來，很多高校學(xué)校定位發(fā)生變化，以建設(shè)研究型大學(xué)為發(fā)展目標(biāo)，以高水平科研工作為重點(diǎn)中心任務(wù)，對教學(xué)工作重視不夠[4]。重科研、輕教學(xué)已成為高校普遍存在的嚴(yán)重問題，許多教師尤其是年輕教師由于剛到工作崗位，缺乏教學(xué)經(jīng)驗(yàn)，教學(xué)能力明顯不足。對此，高校應(yīng)加強(qiáng)青年教師教學(xué)能力培養(yǎng)，可以采取以下措施。

（一）舉辦教學(xué)基本功競賽

一般情況下教學(xué)基本功競賽會對選題、備課、制作課件、上課等各個環(huán)節(jié)制定嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)，并優(yōu)選教學(xué)名師做評委。通過親歷比賽過程，年輕教師能夠較快的掌握教學(xué)各環(huán)節(jié)要點(diǎn)。有些老師可能存在某些小問題，平時(shí)自己卻沒有意識到，通過比賽，有經(jīng)驗(yàn)的評委老師很容易發(fā)現(xiàn)，并針對性幫助其解決、改進(jìn)。另外，學(xué)校應(yīng)重視教學(xué)，如加大教學(xué)成果在工作考核、職稱評定中的比例，以激發(fā)教師教學(xué)積極性，促進(jìn)教師教學(xué)能力的快速提升。

（二）建立“老中青傳幫帶”機(jī)制

建立專業(yè)教研室，充分發(fā)揮老教師對青年教師的傳幫帶作用。鼓勵青年教師先助課、多聽課，多參加教學(xué)研討活動。加強(qiáng)學(xué)校教學(xué)指導(dǎo)委員會的督導(dǎo)和指導(dǎo)作用。教學(xué)指導(dǎo)委員會成員一般都是學(xué)校統(tǒng)一組織選舉的有責(zé)任心、師德高尚、專業(yè)知識淵博、教學(xué)經(jīng)驗(yàn)特別豐富的優(yōu)秀教師。教學(xué)指導(dǎo)委員會可以不定時(shí)去聽課，或針對特定教師進(jìn)行跟蹤聽課，可以起到一定督促作用，同時(shí)幫助他們解決教學(xué)過程中遇到的各種問題。

（三）加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)精品課程學(xué)習(xí)

現(xiàn)如今網(wǎng)絡(luò)信息日益發(fā)達(dá)，尤其是教育資源的開放共享已成為一種世界潮流。我國教育部于2003年正式啟動中國精品課程建設(shè)項(xiàng)目，擬建成數(shù)千門覆蓋各學(xué)科領(lǐng)域，面向本科、研究生等不同層次的精品課程，而且免費(fèi)面向公眾，以實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)教學(xué)資源網(wǎng)絡(luò)共享。如中山大學(xué)、北京大學(xué)、清華大學(xué)等知名高校都有細(xì)胞生物學(xué)的資源共享課。課程計(jì)劃、重點(diǎn)難點(diǎn)、課件、課后題以及教學(xué)案例都可供免費(fèi)參考和學(xué)習(xí)。

參考文獻(xiàn)

[1]韓鶴友,候順,鄭學(xué)剛.新時(shí)期研究生課程教學(xué)改革與建設(shè)探析[J].學(xué)位與研究生教育,2016,(1):25-29.

[2]翟中和,王喜忠,丁明孝.細(xì)胞生物學(xué)[M].北京:高等教育出版社,2011.

[3]陳蕓,詹建立,阿尼克孜•吾吉.提高細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)效果的探索與思考[J].喀什大學(xué)學(xué)報(bào),2015,37(3):82-84.

細(xì)胞生物學(xué)范文第3篇

關(guān)鍵詞： 細(xì)胞生物學(xué) 實(shí)驗(yàn)教學(xué) 改革

細(xì)胞是生命活動的基本單位。細(xì)胞生物學(xué)是生命科學(xué)中至關(guān)重要的基礎(chǔ)學(xué)科，是生命科學(xué)與生物技術(shù)專業(yè)一門重要的專業(yè)基礎(chǔ)課。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是該課程對應(yīng)的實(shí)踐課，其目的不僅是訓(xùn)練學(xué)生的技能，培養(yǎng)學(xué)生的動手能力，更重要的是通過實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)學(xué)生對細(xì)胞生物學(xué)理論知識的聯(lián)想和理解，增強(qiáng)學(xué)生對細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能及生命現(xiàn)象進(jìn)行探討的興趣和思維的自覺性，從而提高學(xué)生的綜合素質(zhì)。近年來，細(xì)胞生物學(xué)和遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等的聯(lián)系日趨密切，理論發(fā)展非常迅速，然而細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)普遍滯后于理論課，存在著諸多缺陷與不足，嚴(yán)重影響了該學(xué)科教學(xué)質(zhì)量的提高［1］。如何根據(jù)高等院校培養(yǎng)目標(biāo)，對實(shí)驗(yàn)課教學(xué)內(nèi)容和方法進(jìn)行改革和充實(shí)，全面提高學(xué)生的實(shí)際操作動手能力，充分調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的主動性，顯得尤為重要。為此，筆者進(jìn)行了一系列相關(guān)的有益的嘗試與探索，并取得了很好的教學(xué)效果。

1.更新和完善細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容體系

高等教育改革的深入，對理論教學(xué)和實(shí)踐教學(xué)提出了更高的要求，重基礎(chǔ)、重實(shí)踐、重效率已成為人們的共識，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)也逐漸從以直觀驗(yàn)證為主的粗放要求，朝著以技術(shù)和技能為主，著力培養(yǎng)學(xué)生綜合運(yùn)用能力和創(chuàng)新能力的方向發(fā)展。我們遵循該教學(xué)原則，對細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行了調(diào)整，比如：普通顯微鏡的使用、紅細(xì)胞凝集反應(yīng)、細(xì)胞膜滲透性等這些細(xì)胞學(xué)科發(fā)展最初被驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)我們進(jìn)行了縮減，因?yàn)檫@些實(shí)驗(yàn)側(cè)重驗(yàn)證書本知識，忽略了對學(xué)生綜合素質(zhì)和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。增加能培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立設(shè)計(jì)能力的一些綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，將國內(nèi)外細(xì)胞生物學(xué)科學(xué)研究新出現(xiàn)的已經(jīng)成熟的科學(xué)實(shí)驗(yàn)充實(shí)到實(shí)驗(yàn)教學(xué)中來。這些新實(shí)驗(yàn)不僅能鍛煉學(xué)生的設(shè)計(jì)能力，同時(shí)更驗(yàn)證了一些基本的理論，比如細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)和觀察。細(xì)胞凋亡機(jī)制研究作為細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的重要進(jìn)展已經(jīng)獲得了諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎，經(jīng)過改進(jìn)后完全可以被用于實(shí)驗(yàn)教學(xué)，僅僅通過對細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)和凋亡現(xiàn)象的觀察這一個綜合性實(shí)驗(yàn)，就可以使學(xué)生有機(jī)而系統(tǒng)地掌握細(xì)胞培養(yǎng)、玻片制作、顯微鏡的使用、電泳等技術(shù)。不僅可增強(qiáng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，而且可以通過對細(xì)胞凋亡試驗(yàn)的有機(jī)編排增強(qiáng)學(xué)生對科學(xué)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)性、嚴(yán)謹(jǐn)性的認(rèn)識，讓學(xué)生進(jìn)一步了解科研設(shè)計(jì)的思路和方法，有利于培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識和提高學(xué)生的綜合能力。

2.改變教學(xué)模式，實(shí)行開放式實(shí)驗(yàn)教學(xué)

傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)課教學(xué)以教師為主體，從實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的選擇、材料的準(zhǔn)備到試劑的配制，完全由教師包辦，學(xué)生無須思考，只要按照教師的講解一步一步地去做，最后按要求寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告。這種“照方抓藥”的教學(xué)方式容易造成學(xué)生的依賴性，使學(xué)生缺乏獨(dú)立自主的創(chuàng)新意識。為改革傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式，筆者從2004年開始，在細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中逐步采用開放式教學(xué)。①開放實(shí)驗(yàn)室，打破以往的實(shí)驗(yàn)室封閉，向?qū)W生開放實(shí)驗(yàn)室，學(xué)生可以向教師預(yù)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。②開放實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，還學(xué)生主動權(quán)，學(xué)優(yōu)生可以根據(jù)所學(xué)知識，自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，在教師指導(dǎo)下修訂實(shí)驗(yàn)方法，完成實(shí)驗(yàn)。③舉行開放式實(shí)驗(yàn)研討會，由學(xué)生當(dāng)主角，將自選研究課題寫成小論文，用PowerPoint形式演講。④實(shí)驗(yàn)報(bào)告以論文形式完成，它涵蓋材料與試劑、方法、結(jié)果、討論四個部分。這些探索旨在進(jìn)一步培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)興趣和實(shí)驗(yàn)操作技能，培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識，提高分析問題和解決問題的能力。

3.重視考核，完善考評體系，促進(jìn)全面發(fā)展

考核是教學(xué)效果的檢查，也是督促學(xué)生學(xué)習(xí)和復(fù)習(xí)的手段。根據(jù)課程特點(diǎn)，細(xì)胞生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)考核應(yīng)以考查學(xué)生運(yùn)用理論知識、運(yùn)用實(shí)驗(yàn)技術(shù)的能力為主要內(nèi)容。一般可以安排或利用一個綜合性實(shí)驗(yàn)。首先，由教師提出實(shí)驗(yàn)?zāi)康?；然后，要求學(xué)生利用所學(xué)的理論知識和實(shí)驗(yàn)技術(shù)，進(jìn)行綜合運(yùn)用，并結(jié)合相關(guān)的基礎(chǔ)理論知識，進(jìn)行綜合分析，得出結(jié)論；最后，教師根據(jù)學(xué)生的操作和分析評分。在考核過程中，對于實(shí)驗(yàn)技術(shù)，應(yīng)以學(xué)生的直接操作作為考核方式，而對于實(shí)驗(yàn)理論知識的考核，可以通過閉卷考試的方式完成，也可以通過要求學(xué)生對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析來考核。此外，在學(xué)生實(shí)驗(yàn)課程成績的評定上，除了嚴(yán)格執(zhí)行上述的考核外，也應(yīng)有一定的靈活性，實(shí)行一定的加分措施。對于能夠自主設(shè)計(jì)、完成實(shí)驗(yàn)，積極申報(bào)、完成開放性實(shí)驗(yàn)的學(xué)生給予一定的加分，以激發(fā)學(xué)生對科學(xué)的求知欲和對本課程的興趣，培養(yǎng)學(xué)生運(yùn)用理論知識分析問題和解決問題的能力。

細(xì)胞生物學(xué)的實(shí)踐課程，其教學(xué)不應(yīng)僅僅作為增強(qiáng)學(xué)生感性認(rèn)識的手段，而應(yīng)讓實(shí)驗(yàn)課成為培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新意識與科學(xué)思維的窗口與平臺［2］［3］。教師應(yīng)通過調(diào)整實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、開放實(shí)驗(yàn)教學(xué)、完善考評體系等措施，發(fā)揮實(shí)驗(yàn)課的實(shí)踐性優(yōu)勢，最大限度地增強(qiáng)學(xué)生的自主性與參與性，為創(chuàng)新性高素質(zhì)人才的培養(yǎng)作出應(yīng)有的貢獻(xiàn)。

參考文獻(xiàn)：

［1］胡敬松，黃晨，鄭黎明等.細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的現(xiàn)狀與改革設(shè)想［J］.西北醫(yī)學(xué)教育，2004，12，（6）：527-528.

［2］張儉，劉勝貴.細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程的改革探索［J］.黔東南民族師范高等專科學(xué)校學(xué)報(bào)，2005，23，（3）：71-72.

細(xì)胞生物學(xué)范文第4篇

關(guān)鍵詞：細(xì)胞生物學(xué)；因需導(dǎo)學(xué)；教學(xué)改革；人才培養(yǎng)

2014年9月9日，在同北京師范大學(xué)師生代表座談時(shí)指出，“世界上沒有兩片完全相同的樹葉，老師面對的是一個個性格愛好、脾氣秉性、興趣特長、家庭情況、學(xué)習(xí)狀況不一的學(xué)生，必須精心加以引導(dǎo)和培育……好老師一定要平等對待每一個學(xué)生，尊重學(xué)生的個性，理解學(xué)生的情感，包容學(xué)生的缺點(diǎn)和不足，善于發(fā)現(xiàn)每一個學(xué)生的長處和閃光點(diǎn)，讓所有學(xué)生都成長為有用之才?！彪S著改革開放的不斷深入，市場也已經(jīng)成為配置人力資源的決定性因素，畢業(yè)生深造和就業(yè)的出路已經(jīng)非常寬廣。因此，沿用以前的一本教材、一套講義、一種教學(xué)方式，已經(jīng)不能適應(yīng)學(xué)生的需求。應(yīng)當(dāng)轉(zhuǎn)變觀念，樹立以學(xué)生為本的育人理念，切實(shí)從學(xué)生的需要出發(fā)，為其提供適用的教學(xué)模式，使不同的學(xué)生在畢業(yè)之后能夠用得上課堂所學(xué)的知識和方法。

一、因需導(dǎo)學(xué)教學(xué)模式的提出

“因材施教”是孔子踐行的最主要的教育教學(xué)原則，是指在教學(xué)中教師根據(jù)不同學(xué)生的認(rèn)知水平、學(xué)習(xí)能力以及自身素質(zhì)，選擇適合每位學(xué)生特點(diǎn)的、有針對性的學(xué)習(xí)方法［1］。2010年頒布并實(shí)施的《國家中長期教育改革和發(fā)展規(guī)劃綱要（2010—2020年）》［2］指出，“要樹立人人成才觀念，面向全體學(xué)生，促進(jìn)學(xué)生成長成才。樹立多樣化人才觀念，尊重個人選擇，鼓勵個性發(fā)展，不拘一格培養(yǎng)人才”。面對新形勢，筆者提出“因需導(dǎo)學(xué)”的教學(xué)理念。即從學(xué)生的個性和需求出發(fā)，引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行有選擇性和有針對性的自主學(xué)習(xí)，從而使每位學(xué)生都能獲得最合適和最有效的收益?！耙蛐鑼?dǎo)學(xué)”的理念，在各級各類教學(xué)過程中都可以貫徹，在大學(xué)生中尤其適用。大學(xué)生畢業(yè)后深造和就業(yè)的方式有多種，應(yīng)該鼓勵他們從自己的人生理想、學(xué)術(shù)興趣、自身?xiàng)l件、深造和就業(yè)去向等各方面的因素出發(fā)，因勢利導(dǎo)，讓他們在課程中尋找到不同的體驗(yàn)、知識和技能，從而使收獲與需求、自身?xiàng)l件相匹配。在我國，大學(xué)教學(xué)工作重視的是專業(yè)教育，學(xué)生從大學(xué)第一天起就確定了專業(yè)，對不同專業(yè)的學(xué)生采用不同的教學(xué)模式。拿生物學(xué)專業(yè)來說，雖然我們期望學(xué)生畢業(yè)后從事與生物學(xué)相關(guān)的工作或研究，但其實(shí)有相當(dāng)一部分的學(xué)生并非如此，而是轉(zhuǎn)到其他專業(yè)或行業(yè)進(jìn)行學(xué)習(xí)和工作。那么對于這些學(xué)生來講，專業(yè)教育對于他們有多大的意義？有沒有更好的教育方法？筆者嘗試從“細(xì)胞生物學(xué)”的教學(xué)中摸索和探討在專業(yè)課中運(yùn)用“因需導(dǎo)學(xué)”的原則，以期對學(xué)生有更好的教學(xué)效果。

二、因需導(dǎo)學(xué)教學(xué)模式的實(shí)踐

（一）通過調(diào)查問卷了解學(xué)生的差異化需求

開展“因需導(dǎo)學(xué)”教學(xué)活動，首先應(yīng)該了解學(xué)生的需求和興趣［3］。作為“細(xì)胞生物學(xué)”課程的任課教師，筆者為了解學(xué)生的需求和興趣，進(jìn)行了細(xì)致的調(diào)研和分析。在“細(xì)胞生物學(xué)”課程的第一堂課上，教師給每位學(xué)生發(fā)放一份調(diào)查問卷，內(nèi)容包括2個問題。①你對現(xiàn)在所學(xué)的生物學(xué)專業(yè)感興趣嗎？②你大學(xué)畢業(yè)后的打算是什么？學(xué)生們作答后上交問卷，教師對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，以最近一屆的學(xué)生為例，共統(tǒng)計(jì)52名學(xué)生，結(jié)果如圖1和圖2所示。從圖1統(tǒng)計(jì)結(jié)果可以看出，對生物學(xué)具有一般興趣的學(xué)生為69％，感興趣的學(xué)生為25％，不感興趣的學(xué)生為6％。關(guān)于畢業(yè)后的打算，從圖2可以看出，63％的學(xué)生打算繼續(xù)深造，23％的學(xué)生還沒想好，14％的學(xué)生要直接工作。因此，筆者針對上述調(diào)查問卷的情況，結(jié)合自己多年的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)，擬采取以下措施開展“因需導(dǎo)學(xué)”教學(xué)活動，其教學(xué)策略是：①對專業(yè)感興趣和畢業(yè)后繼續(xù)深造的學(xué)生，除課堂上的專業(yè)知識學(xué)習(xí)外，還應(yīng)引導(dǎo)他們在課外進(jìn)行更深入地學(xué)習(xí)和鉆研；②對專業(yè)不感興趣、畢業(yè)后要直接工作和還沒考慮好的學(xué)生，要積極培養(yǎng)他們的學(xué)習(xí)興趣，講課時(shí)力求趣味性，知識不能太難，即使他們今后不想從事與生物學(xué)專業(yè)相關(guān)的工作，也要確保他們能學(xué)到有益于今后自身發(fā)展的知識和技能。

（二）通過推薦教材為學(xué)生提供自主選擇學(xué)習(xí)內(nèi)容的空間

選用優(yōu)秀教材是提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，保證學(xué)習(xí)效果的一個重要途徑。近年來，各出版社出版了不少相關(guān)的教材和參考書，經(jīng)過筆者教研室多年的教學(xué)積累，考慮到學(xué)生的差異，教師向?qū)W生推薦中文和英文2種教材，中文教材主要有翟中和教授主編的《細(xì)胞生物學(xué)》（第四版）、王金發(fā)教授主編的《細(xì)胞生物學(xué)》。翟中和教授所著的《細(xì)胞生物學(xué)》教材是我國高校采用較多的“細(xì)胞生物學(xué)”課程的經(jīng)典教材之一，被眾多高校、科研機(jī)構(gòu)指定為細(xì)胞生物學(xué)考研參考書目；王金發(fā)教授是國家教學(xué)名師，多年來一直奮戰(zhàn)在教學(xué)一線，并且每年都組織教學(xué)會議，使全國高校的相關(guān)領(lǐng)域的教師都有機(jī)會學(xué)習(xí)其教學(xué)理念和方法。這2本中文教材結(jié)合教師課堂上的講述，能夠使得絕大部分學(xué)生掌握理解“細(xì)胞生物學(xué)”課程的知識。對于有濃厚興趣、將來要出國深造的學(xué)生，則輔以英文教材，原版英文教材信息量大、圖表案例豐富、知識更新周期短。主要有Alberts等編寫的《MolecularBiologyoftheCell》（GarlandScience，5thEdition，2007）、GeraldKarp等編寫的《CellandMolecularBiology：ConceptsandExperiments》（Wiley，6thEdition，2010）2本教材。它們是細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域非常經(jīng)典的教材，前者是GRE專項(xiàng)考試的常用參考書，后者每個章節(jié)的后面都配有思考題，對于那些感興趣和學(xué)有余力的學(xué)生非常適合。

（三）通過布置課堂討論課題和課后作業(yè)激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣

筆者在美國賓夕法尼亞州立大學(xué)作訪問學(xué)者時(shí)，發(fā)現(xiàn)美國的教育很注重對學(xué)生獨(dú)立思維能力的培養(yǎng)。教師在教學(xué)過程中，只是一個引導(dǎo)者，自己不一定講很多，而是讓學(xué)生自己講，以學(xué)生為主體，調(diào)動學(xué)生的積極性去主動思考、探討，學(xué)生在思考的過程中掌握知識和技能。學(xué)生只有自己先閱讀教材和查閱相關(guān)資料，才能講出來、講得好。這就使學(xué)生從“被動”地接受知識轉(zhuǎn)變?yōu)椤爸鲃印钡卣莆罩R。筆者借鑒美國大學(xué)課堂的做法，在“細(xì)胞生物學(xué)”課程中組織學(xué)生開展了分組研究、集中匯報(bào)和自由討論的教學(xué)活動。討論以3～4人為一個小組，每組研究1個和生物學(xué)相關(guān)的課題，寫出研究報(bào)告并在課堂上匯報(bào)研討成果，然后所有上課的學(xué)生都可以針對匯報(bào)的內(nèi)容提出問題和發(fā)表觀點(diǎn)。前幾年，筆者在教學(xué)討論課上設(shè)定了參考題目，題目主要集中在細(xì)胞生物學(xué)科研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域，如“干細(xì)胞的技術(shù)和應(yīng)用”“重要的細(xì)胞信號通路”等，目的是使學(xué)生的討論相對集中、有重點(diǎn)，但在一定程度上也限制了學(xué)生的思路。最近幾年，筆者沒有設(shè)定參考題目，很多學(xué)生根據(jù)自己生活中感興趣的問題選擇題目，如學(xué)生的選題“從細(xì)胞生物學(xué)角度解讀瑜伽的保健作用”，闡述了瑜伽保健的細(xì)胞生物學(xué)機(jī)理；“你好，色彩”選題探討了日常生活中的植物和動物呈現(xiàn)的色彩和色素分子之間的聯(lián)系。這樣一來，無論對于專業(yè)課是否感興趣，學(xué)生都能找到討論的話題。而那些對專業(yè)課不感興趣的學(xué)生也因?yàn)槠渌麑W(xué)生的選題逐漸對該課程產(chǎn)生興趣。另外，在課后作業(yè)布置的環(huán)節(jié)上，筆者設(shè)計(jì)了不同形式的作業(yè)來引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行多樣化的思考。一種是傳統(tǒng)式的題目，例如“比較線粒體和葉綠體在基本結(jié)構(gòu)方面的異同”“細(xì)胞核的基本結(jié)構(gòu)及其主要功能”，這些題目使所有學(xué)生都能掌握教學(xué)大綱中要求的基本知識。另外一種是開放式的題目，要求學(xué)生寫出“細(xì)胞生物學(xué)”課程每一章內(nèi)容的課后總結(jié)，這樣做的好處有幾點(diǎn)：①促進(jìn)學(xué)生課下學(xué)習(xí)和閱讀教材；②促使學(xué)生梳理知識脈絡(luò)，對前后知識融會貫通；③自由發(fā)揮的空間大，對于認(rèn)真鉆研的學(xué)生，可以寫得很深入，如有的學(xué)生用英文寫總結(jié)，有的學(xué)生按照自己的理解畫出一些細(xì)胞結(jié)構(gòu)和過程的示意圖，有的學(xué)生則結(jié)合生活中遇到的問題寫課程總結(jié)，還有的學(xué)生把細(xì)胞生物學(xué)的內(nèi)容和生物化學(xué)、遺傳學(xué)的內(nèi)容融會貫通寫出總結(jié)。

（四）通過引導(dǎo)學(xué)生自主自發(fā)地開展課外閱讀活動以滿足不同的發(fā)展需求

在進(jìn)行課堂教學(xué)的同時(shí)，教師設(shè)置了課外擴(kuò)展閱讀環(huán)節(jié)。教師將課外閱讀材料在教學(xué)網(wǎng)絡(luò)平臺上，其內(nèi)容主要包括下面3類。①研究方法和學(xué)習(xí)方法的文章。如“MIT實(shí)驗(yàn)室人員是怎樣做學(xué)問的”“如何提高專業(yè)英文閱讀能力”（施一公教授博客文章）等系列文章。另外一些書籍的課外閱讀由該課的課代表課下組織安排，如“如何掌控你的時(shí)間和生活”“創(chuàng)造性的學(xué)習(xí)方法”等文章。②著名生物學(xué)家的研究經(jīng)歷和貢獻(xiàn)。如：《Nature》雜志某一期的“OBITUARY”（訃告）是講生物學(xué)家ChristiandeDuve的，他是著名的細(xì)胞學(xué)家和生物化學(xué)家，發(fā)現(xiàn)了過氧化物酶體和溶酶體，由于對細(xì)胞構(gòu)造的研究貢獻(xiàn)，他獲得1974年的諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎［4］。這一內(nèi)容是對課堂上細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)一章內(nèi)容的補(bǔ)充。③專業(yè)知識的延伸文獻(xiàn)閱讀。如近幾年發(fā)表在《Science》上的文章“HowCellsKnowWhereTheyAre”（細(xì)胞如何知道自己的位置）、“Mysteriesofdevelopment”（發(fā)育的奧秘），是對生物發(fā)育知識的擴(kuò)展延伸；發(fā)表在《CurrentOpinioninGenetics＆Development》上的文章“RolesofG－protein－cou－pledreceptorsignalingincancerbiologyandgenetranscription”（G蛋白耦聯(lián)受體的信號通路在癌癥生物學(xué)和基因轉(zhuǎn)錄方面的作用）、“Mitogen－Acti－vatedProteinKinasePathwaysMediatedbyERK，JNK，andp38ProteinKinases”（ERK，JNK和p38蛋白激酶介導(dǎo)的有絲分裂原活化蛋白激酶通路），是對課堂上信號傳導(dǎo)通路一章內(nèi)容的深入擴(kuò)展。以上內(nèi)容基本上可以滿足不同類別學(xué)生的需求。對細(xì)胞生物學(xué)不感興趣、將來可能不在本專業(yè)就業(yè)的學(xué)生，可以只閱讀第①類材料———關(guān)于研究方法和學(xué)習(xí)方法的文章；對細(xì)胞生物學(xué)興趣一般、但將來可能在本專業(yè)就業(yè)或做研究的學(xué)生，在完成第①類閱讀的基礎(chǔ)上，可以閱讀第②類材料———著名生物學(xué)家的研究經(jīng)歷和貢獻(xiàn)；對細(xì)胞生物學(xué)感興趣、將來愿意在這一領(lǐng)域繼續(xù)研究和深造的學(xué)生，可以在完成第①②類材料的基礎(chǔ)上，閱讀第③類材料———專業(yè)知識的延伸文獻(xiàn)閱讀。這樣，學(xué)生可以根據(jù)自身興趣和需求選擇閱讀差異化的參考文獻(xiàn)，為將來的發(fā)展儲備適用的知識和能力。

三、因需導(dǎo)學(xué)教學(xué)模式的實(shí)踐效果

筆者開展了5年的“因需導(dǎo)學(xué)”教學(xué)活動，幫助學(xué)生學(xué)會了學(xué)習(xí)，激發(fā)了學(xué)生的好奇心，培養(yǎng)了學(xué)生的興趣愛好，營造了獨(dú)立思考、自由探索、善于創(chuàng)新的良好學(xué)習(xí)環(huán)境，取得了較好的教學(xué)效果。在近幾年的學(xué)生評教中，學(xué)生對于“細(xì)胞生物學(xué)”課程的課堂教學(xué)給予了較高的評價(jià)，學(xué)生網(wǎng)上評價(jià)為非常滿意和滿意，分?jǐn)?shù)位于學(xué)院理論課的前5名，小班實(shí)驗(yàn)課的前3名。由于繼續(xù)深造的學(xué)生占很大的比例，而“細(xì)胞生物學(xué)”課程又是大多數(shù)專業(yè)的必考課程，所以很多學(xué)生對“細(xì)胞生物學(xué)”課程的學(xué)習(xí)非常重視，并產(chǎn)生了濃厚興趣，部分學(xué)生進(jìn)入到教師的科研實(shí)驗(yàn)室開展相關(guān)科研項(xiàng)目的研究工作；部分學(xué)生已經(jīng)在本學(xué)科國際和國內(nèi)期刊發(fā)表文章；部分學(xué)生繼續(xù)到國內(nèi)外著名院校進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)方向的深造。另外，就業(yè)與細(xì)胞生物學(xué)無關(guān)的學(xué)生，在談起這門課程時(shí)認(rèn)為“因需導(dǎo)學(xué)”的教學(xué)方法為他們的個性學(xué)習(xí)和發(fā)展提供了空間，使他們學(xué)到了解決問題的方法。

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細(xì)胞生物學(xué)范文第5篇

RT-PCR檢測耐藥相關(guān)基因MDR1、BCL2L1、LRP、PRKCA的表達(dá)取對數(shù)生長期細(xì)胞，TRIzol試劑提取細(xì)胞總RNA，反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA，SYBYGreen方法進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)。引物設(shè)計(jì)由Invitrogen公司合成，見表1。PCR反應(yīng)體系：cDNA1μl，2×SYBRGreenPCRMastermix12μl，引物F/R（上下游引物的終濃度各為15pmol/μl）各0.3μl，DEPC水11.4μl，共25μl。PCR循環(huán)設(shè)置：50℃2min95℃10min（95℃15s60℃1min）×40個循環(huán)（生成擴(kuò)增曲線）95℃15s60℃15s95℃15s（生成溶解曲線）。SDS2.2軟件分析處理數(shù)據(jù)，管家基因校正目的基因的表達(dá)，得到相對定量結(jié)果。1.6耐藥細(xì)胞的保存耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX30分別凍存于含0、10、30nmol/L紫杉醇藥物的凍存液里。于凍存后1、3、6月分別復(fù)蘇細(xì)胞，觀察復(fù)蘇情況，MTT法檢測IC50。1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對有關(guān)數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)（independentsamplet-test）、單因素方差分析（OnewayANOVA），P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2、結(jié)果

2.1耐藥細(xì)胞的建立

SKOV3經(jīng)300μg/ml大劑量的紫杉醇作用2h后,大部分細(xì)胞死亡漂浮，剩余細(xì)胞腫脹，伸出樹枝狀突起呈蜘蛛狀，胞質(zhì)見空泡形成、顆粒增多。少量存活的細(xì)胞克隆生長，恢復(fù)生長至對數(shù)期消化傳代，再進(jìn)行下一次沖擊；SKOV3經(jīng)10~30nmol/L小劑量的紫杉醇作用24h，約50%的細(xì)胞死亡，細(xì)胞體積增大，形態(tài)不規(guī)則，胞質(zhì)內(nèi)顆粒增多，貼壁性變?nèi)酰o藥24~72h內(nèi)最明顯，96~120h后逐漸恢復(fù)原狀。經(jīng)兩種誘導(dǎo)方法獲得的耐藥細(xì)胞系，分別命名為SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30。

2.2耐藥細(xì)胞的生物特性

2.2.1耐藥指數(shù)MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，耐藥細(xì)胞及其敏感細(xì)胞的IC50值及耐藥指數(shù)，可見小劑量濃度遞增誘導(dǎo)的耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX30耐藥性較強(qiáng)，見表2。2.2.2平板克隆形成實(shí)驗(yàn)在無藥物作用時(shí)，SKOV3敏感細(xì)胞較兩種耐藥細(xì)胞系的克隆形成能力強(qiáng)，見圖1A的d組，SKOV3敏感細(xì)胞的克隆形成數(shù)為（934±16.37），SKOV3/TAX300的克隆形成數(shù)為（440±13.75）,SKOV3/TAX30的克隆形成數(shù)為（579±9.50）。與敏感細(xì)胞SKOV3相比，兩種耐藥細(xì)胞克隆形成數(shù)少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均=0.000），見圖1B。而在相同濃度紫杉醇作用下，耐藥細(xì)胞形成的克隆明顯多于敏感細(xì)胞。在紫杉醇濃度為5nM時(shí)，SKOV3/TAX30可形成（1206±9.50）個克隆，SKOV3/TAX300可形成（870±32.30）個克隆，而SKOV3形成的克隆數(shù)僅（202±6.08），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均=0.000）；當(dāng)紫杉醇濃度進(jìn)一步升高為50nM和500nM時(shí)，SKOV3/TAX30和SKOV3/TAX300形成的克隆數(shù)仍明顯高于敏感細(xì)胞SKOV3。紫杉醇濃度為50nM時(shí)，SKOV3細(xì)胞與SKOV3/TAX300細(xì)胞形成的克隆數(shù)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.013）,SKOV3細(xì)胞與SKOV3/TAX30細(xì)胞形成的克隆數(shù)相比，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）；紫杉醇濃度為500nmol/L時(shí)，SKOV3細(xì)胞與SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30細(xì)胞形成的克隆數(shù)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.009、0.0001），見圖1B。2.2.3生長曲線倍增時(shí)間的差異SKOV3敏感細(xì)胞和兩種耐藥細(xì)胞系在相同條件下培養(yǎng)7天，細(xì)胞增殖產(chǎn)生一定的差異。耐藥細(xì)胞的生長較敏感細(xì)胞減慢，生長曲線的斜率減小，見圖2。同時(shí)，根據(jù)生長曲線計(jì)算出SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30細(xì)胞的倍增時(shí)間分別為28.90h、24.0h，與敏感細(xì)胞的倍增時(shí)間20.84h相比也有所延長。

2.3耐藥相關(guān)基因

MDR1、BCL2L1、LRP、PRKCA在各細(xì)胞中的表達(dá)MDR1、BCL2L1、LRP、PRKCAmRNA在SKOV3、SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30細(xì)胞中的相對表達(dá)豐度見圖3A、3B。兩種耐藥細(xì)胞中，MDR1的表達(dá)明顯增高，提示SKOV3/TAX300、SKOV3/TAX30對紫杉醇的耐藥與MDR1高表達(dá)有關(guān)。SKOV3/TAX300細(xì)胞中PRKCA、LRP的表達(dá)均高于SKOV3細(xì)胞，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.016，P=0.005），BCL2L1的表達(dá)與敏感細(xì)胞比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.815）。而SKOV3/TAX30細(xì)胞的PRKCA、LRP的表達(dá)與敏感細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.154，P=0.206）。BCL2L1的表達(dá)低于敏感細(xì)胞（P=0.001），見圖3B。以上數(shù)據(jù)表明不同誘導(dǎo)方式導(dǎo)致耐藥細(xì)胞發(fā)生不同生物學(xué)變化，可能存在不同的耐藥機(jī)制。

2.4耐藥細(xì)胞的保存

耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX30分別凍存在含有0、10、30nM紫杉醇的凍存液中，于凍存后1、3、6月復(fù)蘇，檢測IC50，見表3。1、3月后檢測結(jié)果提示，在3種藥物濃度條件下的細(xì)胞IC50沒有明顯區(qū)別，但凍存6月后，無藥凍存組的耐藥細(xì)胞與兩種加藥凍存組的細(xì)胞比較，其IC50明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。同一個藥物濃度條件下，無藥凍存組的耐藥細(xì)胞在凍存6月時(shí)，出現(xiàn)耐藥性下降，而兩種加藥凍存組細(xì)胞在6月的凍存過程中，細(xì)胞IC50雖然出現(xiàn)輕度下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3、討論

3.1耐藥細(xì)胞的建立

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：增加給藥劑量、適當(dāng)延長無藥間歇期，可能延緩細(xì)胞的耐藥性。由于大劑量沖擊誘導(dǎo)與臨床治療模式相似，臨床上體內(nèi)耐藥指數(shù)≥2倍即足以導(dǎo)致化療失敗[5]，因此大劑量沖擊誘導(dǎo)產(chǎn)生的耐藥細(xì)胞雖然耐藥指數(shù)較低，也是模擬臨床耐藥的良好模型。

3.2耐藥細(xì)胞的特性

本研究的結(jié)果表明：在無藥物作用時(shí)，SKOV3細(xì)胞的集落形成能力強(qiáng)于兩種耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30，但在不同濃度紫杉醇藥物條件下，耐藥性最強(qiáng)的SKOV3/TAX30集落形成能力也最強(qiáng)，而敏感細(xì)胞SKOV3的集落形成能力最弱，此結(jié)果與MTT法檢測的耐藥性一致。紫杉醇的作用機(jī)制是促進(jìn)微管蛋白二聚體裝配成微管，抑制紡錘體形成，將細(xì)胞阻斷于G2/M期，細(xì)胞的有絲分裂異?；蛲Ｖ梗苟嗪思?xì)胞的形成增多[6]。誘導(dǎo)的過程中耐藥細(xì)胞膨脹、形態(tài)不規(guī)則、細(xì)胞體積的增大可能與細(xì)胞群體中多核細(xì)胞的增多有關(guān)。本研究的生長曲線實(shí)驗(yàn)中，SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30的倍增時(shí)間分別為28.9、24.0h，與敏感細(xì)胞SKOV3的倍增時(shí)間20.84h相比有明顯延長，顯示耐紫杉醇的卵巢癌細(xì)胞生長速度減慢。細(xì)胞周期的阻滯，除導(dǎo)致一些細(xì)胞周期特異性藥物失效外，腫瘤細(xì)胞處于相對靜止?fàn)顟B(tài)，易對化療藥物產(chǎn)生耐受。

3.3耐藥相關(guān)基因的檢測

卵巢癌紫杉醇耐藥機(jī)制的研究中，多藥耐藥（multidrugresistance，MDR）一直是熱點(diǎn)。多藥耐藥是指對一種藥物具有耐藥性的同時(shí)，也對其他結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制完全不同的化療藥物產(chǎn)生交叉耐受的一種現(xiàn)象。多藥耐藥的產(chǎn)生是一個多因素的過程，主要包括：（1）細(xì)胞內(nèi)有效藥物濃度的降低；（2）細(xì)胞內(nèi)藥物活性的改變；（3）凋亡的抑制；（4）腫瘤細(xì)胞微環(huán)境改變化療敏感度。P-gp是多藥耐藥基因MDR1編碼的相對分子質(zhì)量為17kD的一種跨膜糖蛋白，其功能是使細(xì)胞內(nèi)藥物濃度降低，藥物的作用減弱或喪失，細(xì)胞由此獲得耐藥性。與大多數(shù)其他化療藥物的多藥耐藥機(jī)制相似，紫杉醇作為P-gp的作用底物之一，其耐藥機(jī)制與MDR1基因擴(kuò)增導(dǎo)致的P-gP高表達(dá)密切相關(guān)[7-8]。肺耐藥相關(guān)蛋白LRP是在多藥耐藥的肺癌細(xì)胞株中發(fā)現(xiàn)的與MDR相關(guān)的非糖蛋白，相對分子質(zhì)量為110kD，能阻止藥物通過核孔進(jìn)入細(xì)胞核，避免其作用于核內(nèi)靶點(diǎn)，藥物運(yùn)送到胞質(zhì)的囊泡中，再通過胞吐作用將藥物排出體外，從而發(fā)生紫杉類藥物耐藥[9-10]。凋亡抑制基因也參于紫杉醇耐藥。BCL2L1基因，全稱為BCL-2樣1基因（BCL-2-like1）,編碼蛋白屬于BCL-2蛋白家族，BCL-2蛋白家族通過抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致耐藥性[11-12]。PRKCA基因?yàn)榈鞍准っ窩α（proteinkinaseCalpha），也被稱為PKCA、PRKACA、KPCA、AAG6。細(xì)胞過度增殖和抗細(xì)胞凋亡機(jī)制障礙都可導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展和耐藥現(xiàn)象發(fā)生[13]。另外PKC的作用是使底物蛋白磷酸化而活化，p-gp是PKC的作用底物，當(dāng)其表達(dá)增加或活性增強(qiáng)時(shí)，可使大量的P-gp磷酸化而活化，從而產(chǎn)生耐藥性。本研究結(jié)果提示。SKOV3/TAX300細(xì)胞PRKCA、LRP的表達(dá)均略高于敏感細(xì)胞。但SKOV3/TAX30細(xì)胞的PRKCA、LRP的表達(dá)與敏感細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BCL2L1在SKOV3/TAX30細(xì)胞的表達(dá)低于敏感細(xì)胞，但SKOV3/TAX300細(xì)胞中BCL2L1的表達(dá)略高于敏感細(xì)胞，結(jié)果提示不同方式誘導(dǎo)的耐藥細(xì)胞，可能存在不同的耐藥機(jī)制。

3.4耐藥細(xì)胞的保存