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來到那里,我本以為是在酒店舉行的,可爸爸告訴我,他們是在家里辦的。
那里人很多,一個個向新娘和新郎的父母問好。有些也遞上自己的一點心意:禮物和錢什么的。
我在門口等了很久,才看到新郎官,我便跑去向表叔問好,并祝他新婚快樂。
婚禮開始了,大家都坐在各自的座位上,等待著新娘出來,當(dāng)新娘子出來也就是我未來的表嫂出來時,大家都?xì)g呼起來,因為新娘子太漂亮了,我默默的想:“表叔可真幸福啊,娶到了這么一個漂亮的表嫂。”媽媽告訴我,表嫂肚子里已經(jīng)有兩個多月的小寶寶了。我聽了很驚訝。
就這樣,大家喝完喜酒紛紛散了。
過年趣事多,是寫不完的。
香港每天會播放很多遍國歌,送大量的學(xué)生到大陸的各個地區(qū)參加夏令營,另外還為香港學(xué)生提供更多的大陸學(xué)校。這些活動也得到了回報。
香港特別行政區(qū)基本法的第5條明確表明:“香港特別行政區(qū)不實行社會主義制度和政策,保持原有的資本主義制度和生活方式,五十年不變。”十年來,香港和當(dāng)?shù)鼐用竦纳罘绞娇瓷先タ赡軟]有改變。但是,任何一個在這個城市中生活的人都能夠感覺到過去10年的變化,一些是有形的,另一些是無形的。并且,香港人自己應(yīng)該為這些變化負(fù)責(zé)任。
對于非中國居民和游客而言,香港現(xiàn)在是一個更為溫和、缺少自信的城市。先天優(yōu)于任何一個中國大陸人的感覺已經(jīng)完全蒸發(fā)了;阿燦,由電視媒體創(chuàng)造出來諷刺鄉(xiāng)下人的名稱,本來代表著每一個大陸人,但是現(xiàn)在已經(jīng)從日常的用語中消失了。
現(xiàn)在,香港人正逐漸變成大陸人。事實上,如果當(dāng)香港人在通過深圳邊界的時候,沒有慷慨地消費,就會發(fā)現(xiàn)他們自己被叫做“港燦”。
1997年7月2日亞洲經(jīng)濟(jì)危機爆發(fā),泰國貨幣崩潰,也給那些平靜和傲慢的香港人帶來一系列痛苦和致命的打擊。
面對這些悲哀――財政危機、禽流感、“非典”、8%的失業(yè)率、低迷的股票市場――香港人做出了選擇。面子、驕傲、深深的優(yōu)越感,這樣典型的香港人形象都已經(jīng)拋到一邊。
中國政府沒有絲毫猶豫,拋出一個個救生圈,至今仍然這樣做,盡管時不時地提醒這只是短期的治療方法,香港需要解決自己存在的根本矛盾。
好時光又回來了,香港現(xiàn)在又一次搖曳起來了。這是很多外國旅客和當(dāng)?shù)氐囊泼袼吹降摹?/p>
同時,有形的變化還有:
1、已經(jīng)有50萬香港畢業(yè)生在中國大陸工作。同時,這個數(shù)目和在過去英國領(lǐng)導(dǎo)時期,流向加拿大、澳大利亞和美國的富裕的香港專業(yè)人才數(shù)量相等。
2、處于經(jīng)濟(jì)低層的是那些嫁給香港男人的大陸女性。
3、香港再也不是亞洲第二大繁榮的港口。上海已經(jīng)超過了它,并且深圳也很快要超過它。
4、在1997年從英國人手中接過來之前,任何在一個當(dāng)?shù)仫埖暾f國語的人,能夠被在旁邊桌子上面的人粗魯?shù)貧颍瑫r還會故意嚎出一首廣東歌?,F(xiàn)在國語能夠在香港任何地方被聽到。
5、在香港的飯店和夜總會,花錢最多的是大陸人。香港人在等待他們的小費,香港的大款們卻把他們的錢扔向北京和上海。
現(xiàn)在香港的經(jīng)濟(jì)仍然處在不穩(wěn)定的狀態(tài),并且需要平衡房地產(chǎn)市場的反彈。保持現(xiàn)在這樣的進(jìn)展對富裕的香港人來說是不足夠的。如果這樣不穩(wěn)定的香港特征仍在他們這一輩子持續(xù)下去,將不得不需要大陸市場的大量資金注入。
香港的股票市場超過紐約市場的貿(mào)易交易額成為世界上最大的財政市場,但是,即使更高的水平的貿(mào)易從今開始,它充其量也只是短暫的現(xiàn)象――上海已經(jīng)超過了他們。
現(xiàn)在沒有任何一件事情比最近的人民幣上漲更令人關(guān)注。大陸的人民幣現(xiàn)在比港元更為值錢。香港人曾經(jīng)認(rèn)為港元將要最終在整個中國流通。
在港元下跌到比人民幣低的那一天,一個年長的男人剛從深圳回來,從西灣河地鐵站沖出來,大叫:“深圳現(xiàn)在沒有人接受港元!港元和戰(zhàn)后的日元一樣了!”
只是在幾周之前,中國的電視顯示大陸游客被香港的珠寶商欺騙。香港旅游行業(yè)的領(lǐng)導(dǎo)們立即乘坐到北京的第一班飛機,表示保證糾正這樣的行為。
這個根本不值得驚訝。其中一個最大的原因是,自從交接后,北京已經(jīng)對香港放寬政策,它放開了到香港的旅游團(tuán)的限制,并且允許個人到香港旅游和消費。
同時,香港每天會播放很多遍國歌,送大量的學(xué)生到大陸的各個地區(qū)參加夏令營,另外還為香港學(xué)生提供更多的大陸學(xué)校。
自身體驗確信市場前景
當(dāng)即郵購樣品進(jìn)行試用
郭向軍又驚又喜!
家住浙江金華地區(qū)東陽市的郭向軍,一直經(jīng)營著一家裝飾公司。近些年,裝修行業(yè)發(fā)展迅速,郭向軍的裝修生意一直不錯,但是讓他一直苦惱和頭疼的是,自己帶領(lǐng)手下弟兄每次辛辛苦苦完成裝修工程后,工程款卻遲遲被拖欠難要回。弟兄們追著要他要工資,他便愁眉不展、寢食不安。一次,郭向軍通過媒體看到《小小鞋臭凈 走出大市場》的文章,強烈吸引了他的眼球。
這是因為郭向軍對于鞋臭和腳臭現(xiàn)象,有著特別的經(jīng)歷和感受!郭向軍深切體諒手下兄弟們每天工作的辛苦和勞累,所以一有時間就到職工宿舍看望大家。兄弟們勞作一天、鞋里自然濕漉漉,大量細(xì)菌便會滋生,腳臭便不可抑制地充斥在整個職工宿舍里,直熏的人作嘔和頭暈。每次,郭向軍都是強制自己多和弟兄們聊一會,但都因無法忍受直撲口鼻的腳臭味而逃跑。那以后,郭向軍一直留意市場,想找到一種專門除腳臭和鞋臭的好產(chǎn)品,卻一直沒能如愿。
郭向軍有個習(xí)慣,每次每項工程結(jié)束后,都要帶領(lǐng)手下兄弟來到足療店放松一下,給大家解解乏??擅恳淮味紩軐擂唯D―當(dāng)大家一起脫下鞋子時,整個足療店立即彌漫了難以言表的腳臭味。再瞧瞧那些服務(wù)小姐,都是捏著鼻子,用最快的速度把一雙雙臭鞋鎖進(jìn)鞋柜。做足療時,服務(wù)小姐更是沒了微笑,那表情讓人很不自在。每當(dāng)這時,郭向軍心里想到的便是:如果市場上能有快速祛除鞋臭、腳臭和襪子臭的產(chǎn)品該多好啊。
由于一直盼望鞋臭凈產(chǎn)品早日出現(xiàn),所以當(dāng)郭向軍無意間看到鞋臭凈產(chǎn)品的文章后,真是欣喜萬分。他深知這個產(chǎn)品有著巨大的市場需求,有著絕對喜人的廣闊前景??次恼潞?,他隨即和廠家取得聯(lián)系索要樣品。郭向軍之所以這樣迫不及待,是心里有個強烈的想法:如果產(chǎn)品效果好,自己就改行經(jīng)銷這個解除人們煩惱的產(chǎn)品,保準(zhǔn)賺錢。
收到產(chǎn)品后,他拿給手下弟兄們試用,如同介紹的一樣:再臭的鞋子,只要噴上幾下鞋臭凈,馬上穿上鞋子五分鐘后再脫下鞋子臭味全無,鞋子、襪子和腳丫彌漫著一股淡淡的清香……
銷售大王本領(lǐng)大
賣鞋臭凈更發(fā)家
安徽阜陽市利辛縣的蘭軍,人稱“江湖銷售大王”。多年來一直游走于“江湖”,在許多城市的街頭巷尾、人流密集處擺地攤賣些小玩意兒,憑借三寸不爛之舌,不但利潤可觀(日盈利有時突破5000元),而且他還把自己的銷售網(wǎng)絡(luò)擴大發(fā)展成500多人的銷售團(tuán)隊,成為聞名皖西的一支自行組建的銷售大軍。
蘭軍在街頭銷售前,曾和妻子靠撿破爛為生,每天辛苦勞累還賺不了幾個錢。結(jié)識一些江湖銷售大王后,夫妻兩人也學(xué)著對方搞起了街頭銷售。蘭軍多年銷售經(jīng)歷中,賣的最好的產(chǎn)品是不起眼的“腳氣水”,而且好的時候日銷售量突破500瓶,日賺3000多元。蘭軍和妻子兩人結(jié)伴銷售,在城市的街頭巷尾、學(xué)校門前、小區(qū)工廠宿舍,凡是人多的地方,都能見到兩人的身影。其實,兩人的銷售方法很簡單,一張桌子擺放產(chǎn)品、一張易拉寶宣傳畫,其次便是嘴上功夫。
蘭軍通過媒體看到好媳婦牌鞋臭凈的報道后,真是驚喜萬狀。他強烈地意識到這是最適合自己的好項目。自己能把腳氣水小產(chǎn)品賣的順暢,何況正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品,且除臭效果立竿見影,經(jīng)銷這樣的好產(chǎn)品自會財源滾滾滾。幾天后,蘭軍便前往廠家生產(chǎn)基地考察?;丶液螅m軍把自己帶回的產(chǎn)品分發(fā)給手下也做江湖銷售的弟兄們試用。和預(yù)料中的一樣,大家試用產(chǎn)品后紛紛給他要貨。幾分鐘就能徹底除臭,這樣的好產(chǎn)品自然讓大家爭相要貨。見此情景,蘭軍滿意地笑了,當(dāng)即從上海么尼公司定了100件產(chǎn)品。結(jié)果,兩萬盒產(chǎn)品短時間內(nèi)銷售一空。今年,蘭軍有了新想法新目標(biāo),他希望與廠家有更深度的合作,即讓廠家完全按照自己的包裝和規(guī)格設(shè)計。蘭軍之所以有特別要求,是因為他決定帶領(lǐng)手下的銷售大軍,加大力度開拓全國市場,并打出自己的獨有品牌。
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好媳婦牌鞋臭凈,選用多種天然中草藥為原料,具有天然芳香、迅速殺菌除臭、使用方便、攜帶方便等特點。無論多臭的腳,只要在鞋內(nèi)噴上幾下,幾分鐘后臭味徹底消失,并使鞋內(nèi)長期流香。長期使用,讓你徹底告別腳臭,并能預(yù)防腳氣。(注:要樣品者,請附38元郵寄費。)
上海么尼生物科技有限公司
生產(chǎn)基地:河南省平輿健康路西段16號
招商:13507666833 13939697589
0396-5028641(兼?zhèn)髡妫?/p>
【摘要】 目的動態(tài)檢測虎眼萬年青總皂苷對二乙基亞硝胺誘發(fā)的大鼠肝癌變過程中肝組織中IGF-2及P16ink4a表達(dá)的影響。方法二乙基亞硝胺誘發(fā)大鼠肝癌變,虎眼萬年青總皂苷干預(yù),運用實時定量PCR法檢測并分析第14周末預(yù)防組、模型組及18周末治療組癌旁組織、癌組織、模型組癌組織標(biāo)本中IGF-2及P16ink4a的表達(dá)。結(jié)果肝癌變模型組18周癌組織中IGF-2表達(dá)最高,與正常組、14周末預(yù)防組、模型組、18周末治療組癌旁組織及癌組織間比較均有統(tǒng)計學(xué)意義(P
【關(guān)鍵詞】 虎眼萬年青總皂苷; 二乙基亞硝胺; 肝; 實驗; IGF-2; P16ink4a
二乙基亞硝胺所誘導(dǎo)大鼠肝癌表達(dá)眾多基因中,以胰島素樣生長因子2(IGF-2)、p75NTR關(guān)聯(lián)細(xì)胞死亡執(zhí)行子ADE、細(xì)胞周期依賴性激酶抑制基因(pl6Ink4a)與腫瘤的關(guān)系尤為突出[1]?;⒀廴f年青Ornithogalum caudatum Ait為百合科多年生球根植物,民間全草入藥,用于抗炎癥、抗腫瘤等治療?;⒀廴f年青皂苷(OSW-1)抗P338淋巴細(xì)胞白血病活性,是常見抗癌藥物喜樹堿、阿霉素、紫杉醇抗癌活性的10~100倍[2]。由于OSW-1提取、合成工藝復(fù)雜且較昂貴,給廣泛的實驗、應(yīng)用研究工作帶來一定困難。為了進(jìn)一步開發(fā)和利用虎眼萬年青植物,本實驗應(yīng)用虎眼萬年青總皂苷檢測對二乙基亞硝胺誘發(fā)的大鼠肝癌變過程中肝組織中IGF-2 和P16ink4a表達(dá)水平的影響。
1 材料
1.1 藥物提取
取植物虎眼萬年青,在自然條件下干燥,粉碎成粉。加入95%的乙醇浸泡24 h,紗布、濾紙過濾后,收集濾液,濾渣繼續(xù)加入乙醇浸泡,同上方法循環(huán) 3次,收集濾液,將3次所得濾液合并。濾液經(jīng)減壓濃縮為原來體積的1/5,再用1/3體積的石油醚萃取脫脂,保留水相,再次減壓蒸餾后,加水稀釋上AB-8柱吸附,反復(fù)吸附3次,6~8倍柱體積水洗掉糖后用5倍柱體積95%乙醇洗脫皂苷。所得皂苷洗脫液,經(jīng)D-280柱脫色后,減壓濃縮后蒸干,即為虎眼萬年青總皂苷。
1.2 實驗動物及設(shè)計
雄性Wistar清潔級大鼠30只,體質(zhì)量130~150 g,購自延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物中心。動物適應(yīng)3 d后開始實驗。正常組:整個實驗過程中均飲用滅菌自來水及基礎(chǔ)飼料,并于18周末宰殺6只。模型組:每日給予基礎(chǔ)飼料同時,用滅菌自來水配制濃度為95 μg/ml的二乙基亞硝胺(DEN)溶液(美國Sigma公司,避光保存,新鮮配制),供大鼠自由飲用,每天更換1次。連續(xù)飲用4周后,改飲一般的滅菌自來水4周,再繼續(xù)飲含95 μg/ml的DEN溶液。并分別于飼養(yǎng)第14周末、18周末分別宰殺各6只。肝硬化預(yù)防組:于實驗開始在肝癌模型建立的同時, 根據(jù)預(yù)實驗小鼠虎眼萬年青總皂苷的LD50為3.2g/kg, 以接近于LD50之1/30的劑量,即相當(dāng)于100mg/kg的給藥濃度,以蒸餾水制成所需濃度的混懸液,每日灌胃并于14周末宰殺6只。肝癌治療組:第14周后從模型組中隨機選出6只,按模型組飼養(yǎng)同時給予虎眼萬年青總皂苷100mg/kg,并于第18周末宰殺。
1.3 取材及處理
各組大鼠宰殺前禁食12h,稱體質(zhì)量,乙醚麻醉后, 解剖腹腔,取肝組織,出現(xiàn)癌灶者取肉眼癌結(jié)節(jié)及距癌灶邊緣0.5~1cm癌旁組織約50~100mg樣品,生理鹽水沖洗,液氮快速冷凍,并置-70℃冰箱,待統(tǒng)一檢測。
1.4 試劑及器材
TRIZOL試劑、無RNA酶的水、無RNA酶的糖原(Invitrogen life technologies);氯仿、異丙醇、100%乙醇、乙酸鈉、甲醛(上海化學(xué)試劑有限公司);Tris-HCl、EDTA 、MOPS、溴化乙錠、2.5 mM dNTP混合液、100 bp DNA Ladder(華美生物工程公司);RNA酶抑制劑;MMLV反轉(zhuǎn)錄酶;5xRT緩沖液(上海生工生物工程有限公司)。DK-8D型電熱恒溫水槽(上海森信實驗儀器有限公司);Gene Amp PCR System 9700(Applied Biosystems);FeroTec Gradien PCR基因擴增儀(杭州大和熱磁電子有限公司);DYY-8型穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀(上海琪特分析儀器有限公司);H6-1微型電泳槽(上海精益有機玻璃制品儀器廠);ABI 7700 Realtime PCR儀(ABI);引物設(shè)計軟件:Primer 5.0。
1.5 統(tǒng)計學(xué)方法
全部數(shù)據(jù)采用 SPSS14 for Windows統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行處理,進(jìn)行t檢驗、方差分析。
2 方法
2.1 樣品的RNA抽提
①每50~100 mg組織樣品,加入1 ml的TRIZOL試劑,用電動勻漿器進(jìn)行勻漿。②勻漿后樣品于15~30℃孵育5 min。每1 ml的TRIZOL試劑勻漿的樣品中加入0.2 ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15 s后,15到30℃孵育2~3 min。4℃下12 000 r·min-1離心15 min。③將水相轉(zhuǎn)移到新離心管中。水相與異丙醇混合以沉淀其中的RNA,加入異丙醇的量為每個樣品勻漿時加入1 ml TRIZOL試劑的此時加0.5 ml的異丙醇?;靹蚝?5到30°C孵育10 min后,于4℃12 000 r·min-1離心10 min。④移去上清液,每毫升TRIZOL試劑勻漿的樣品中加入至少1 ml的75%乙醇,清洗RNA沉淀。振蕩后,4℃ 7 500 r·min-1離心5 min。⑤去除乙醇溶液,空氣中干燥RNA沉淀5~10 min,先加入無RNA酶的水用槍反復(fù)吹打幾次,然后55到60℃孵育10 min。獲得的RNA溶液保存于-70℃。
2.2 使用樣品的RNA進(jìn)行cDNA合成
2.2.1 配制退火混合物RNA 2 μg,0.5 μg/μl Oligo(dT)18 1μl,加無RNA酶的H2O至總體積 10 μl混合液在70℃水浴3 min,降到37℃放置10 min。
2.2.2 RT反應(yīng)液(5xRT緩沖液4μl,2.5mmol/L dNTP混合液4μl,RNA酶抑制劑1 μl,MMLV反轉(zhuǎn)錄酶1 μl,混合后37℃恒溫1 min)。
2.2.3 加10 μl的RT反應(yīng)液到10 μl退火混合物中,37℃水浴60 min,加熱到95℃維持5 min。得RT終溶液即cDNA溶液,置冰浴待用。
2.3 合成的cDNA用于實時定量PCR
2.3.1 制備用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的梯度稀釋DNA模板
針對每一需要測量的基因和管家基因,選擇一確定表達(dá)該基因的cDNA模板進(jìn)行PCR反應(yīng):dNTP(2.5 mmol/L each)(2.5 μl);10 × PCR緩沖液(2.5 μl);MgCl2 溶液(1.5 μl);Taq聚合酶(1U);10 μmol的PCR特異引物F(1 μl);10 μmol的PCR特異引物R(1 μl);cDNA(1 μl);加水至總體積為25 μl。輕彈管底將溶液混合,40個PCR循環(huán)(94℃,20 s;退火溫度,20 s;72℃,30 s);72℃延伸5 min。
將PCR產(chǎn)物進(jìn)行10倍梯度稀釋:設(shè)定standard1的濃度為106,standard 2的濃度為105 ,standard 3的濃度為104,standard 4的濃度為103,standard 5的濃度為102,standard 6的濃度為10,standard 7的濃度為1。見圖1。
2.3.2 進(jìn)行Realtime PCR反應(yīng)
幾個梯度稀釋的DNA模板以及所有cDNA樣品分別配置Realtime PCR反應(yīng)體系。體系配置如下:dNTP(2.5mM each)(2.5μl);10x PCR緩沖液(2.5 μl)MgCl2 溶液(1.5 μl);Taq聚合酶(1units);Sybergreen(終濃度0.25×);50X Rox(0.5 μl);10 μmol/L的PCR特異引物F(1μl);10 μmol/L的PCR特異引物R(1 μl);cDNA or DNA(1 μl);加水至總體積為25 μl。輕彈管底將溶液混合,5000 r/min短暫離心。
步驟1配置的PCR反應(yīng)溶液置于Realtime PCR儀上進(jìn)行PCR反應(yīng)。
Beta-actin(雙向引物序列F:5'CCTCTATGCCAACACAGTGC3' R:5'GTACTCCTGCTTGCTGATCC3' 退火溫度(℃) 59產(chǎn)物長度(bp) 211): 95℃,3 min;40個PCR循環(huán)[95℃,15 s;59℃,20 s;72℃,20 s;83℃(收集熒光),15 s]。為了建立PCR產(chǎn)物的熔解曲線,擴增反應(yīng)結(jié)束后,95℃,2 min;61℃,20 s;72℃,20 s;99℃,10 s,并從72℃緩慢加熱到99℃(8 min)。見圖2。
IGF-2[雙向引物序列: F5'GCCATTTGGAACATTGGACAG 3' R:5'TCCCACGAGGCATATTAACACT 3'退火溫度(℃)60產(chǎn)物長度(bp)149]: 95℃,3 min;40個PCR循環(huán)[95℃,15 s;60℃,20 s;72℃,20 s;79℃(收集熒光),15 s]。為了建立PCR產(chǎn)物的熔解曲線,擴增反應(yīng)結(jié)束后,95℃,2 min;61℃,20 s;72℃,20 s;99℃,10 s,并從72℃緩慢加熱到99℃(8 min)。見圖3。
p16Ink4a(雙向引物序列F:5'ACCAAACGCCCCGAACA 3'R:5'GAGAGCTGCCACTTTGACGT3'退火溫度(℃)60,產(chǎn)物長度(bp)76): 95℃,3min;40個PCR循環(huán)[95℃,15 s;60℃,20 s;72℃,20 s;80℃(收集熒光),15 s]。為了建立PCR產(chǎn)物的熔解曲線,擴增反應(yīng)結(jié)束后,95℃,2 min;62℃,20 s;72℃,20 s;99℃,10 s,并從72℃緩慢加熱到99℃(8 min)。見圖4。
3 結(jié)果
各樣品的目的基因和管家基因分別進(jìn)行Realtime PCR反應(yīng)。根據(jù)繪制的梯度稀釋DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線,各樣品目的基因和管家基因的濃度結(jié)果直接由機器生成。每個樣品的目的基因濃度除以其管家基因的濃度,即為此樣品此基因的校正后的相對含量。實時定量PCR時各樣品加樣量均為1 μl,然而由于受RNA濃度定量誤差和RNA逆轉(zhuǎn)錄效率誤差等的影響,每個樣品的1 μl體積的cDNA其含量并不完全相同,為校正此差異,使用管家基因beta-actin作為內(nèi)參,以樣品待測基因得值除以此樣品內(nèi)參值,最終得到的比值為樣品的待測基因相對含量。見表1。表1 各組肝組織校正后1 μl中IGF-2及p16ink4a含量(略)
在IGF-2中,與模型組18周癌組織比較,*P0.05
4 討論
肝癌是由病毒、化學(xué)致癌物等多病因作用[3],因癌基因或癌相關(guān)基因激活、抗癌基因失活或胚胎期某些酶基因重新復(fù)活等諸多因素引起肝細(xì)胞生長失控而致癌變,經(jīng)啟動、促進(jìn)、演變多階段的發(fā)病過程,其中基因的調(diào)控和表達(dá)、多種生長因子的活性等均與肝癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[4]。
IGF-2在胎肝和新生兒肝臟中有大量表達(dá),但出生后基因迅速降低直至關(guān)閉,肝細(xì)胞癌變IGF-2呈胚胎性過量表達(dá),并具有強烈的致有絲分裂劑作用,參與腫瘤細(xì)胞增生及分化[5]。IGF-2為肝癌的一種缺氧誘導(dǎo)血管生成因子,肝硬變再生結(jié)節(jié)和肝癌細(xì)胞的快速分裂導(dǎo)致肝臟供血不足,造成局部缺氧狀態(tài),促使IGF-2合成增加,并作為血管活性因子,間接促進(jìn)血管內(nèi)皮生長因子的合成,刺激肝癌新生血管的形成;IGF-2在肝細(xì)胞癌變發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,可能為誘癌因素導(dǎo)致IGF-2基因異常激活和過量表達(dá),促使具有高增殖活性狀態(tài)的癌前肝細(xì)胞轉(zhuǎn)化,最終導(dǎo)致肝癌發(fā)生[6]。
本研究以實時定量PCR法定量分析了二乙基亞硝胺誘發(fā)肝癌變過程IGF-2的表達(dá)與變化。結(jié)果顯示癌變過程中肝組織中IGF-2含量逐漸增加,肝癌進(jìn)展階段肝癌組織中IGF-2表達(dá)水平明顯增高,說明肝癌細(xì)胞的快速分裂導(dǎo)致肝臟供血不足,IGF-2表達(dá)水平急劇升高。虎眼萬年青總皂苷在肝癌變前期對IGF-2表達(dá)水平作用不大,而至肝癌進(jìn)展階段,經(jīng)虎眼萬年青總皂苷干預(yù)的肝癌組織的IGF-2表達(dá)量明顯低于模型組,說明虎眼萬年青總皂苷抑制肝癌細(xì)胞的快速分裂。而虎眼萬年青總皂苷干預(yù)的肝癌組織IGF-2表達(dá)水平高于癌旁組織,但無統(tǒng)計學(xué)意義,能否說明IGF-2主要是通過肝細(xì)胞癌自分泌方式表達(dá)其水平,有待進(jìn)一步深入研究。
p16ink4a基因是直接作用于細(xì)胞周期、抑制細(xì)胞分裂的抑癌基因,屬細(xì)胞周期依賴性激酶抑制因子(CDKI)基因家族,所編碼的P16蛋白可直接與CDK4結(jié)合,抑制CDK4-cyclin D復(fù)合體的催化活性,抑制結(jié)合成全酶磷酸化Rb蛋白,從而發(fā)揮細(xì)胞分裂周期的負(fù)性調(diào)控作用[7],使細(xì)胞停滯于G1/S轉(zhuǎn)換點。人原發(fā)性肝癌存在高頻率的p16ink4a基因5 CpG島甲基化所致的p16基因失活,而這個基因缺失和突變的頻率比較低[8]。外源性p16基因?qū)?Rb-的SMMC7721的生長無抑制作用,p16ink4a對肝癌細(xì)胞生長抑制的作用可能依賴于Rb途徑的完整性;Rb可通過對p16ink4a 基因啟動子的負(fù)調(diào)節(jié)作用抑制其蛋白表達(dá),在功能性Rb缺如的細(xì)胞中p16ink4a 蛋白表達(dá)水平升高[9]。
本研究以二乙基亞硝胺誘發(fā)大鼠肝癌,實時定量PCR檢測肝癌變中肝組織、肝癌組織及癌旁組織的p16ink4a表達(dá)水平,結(jié)果顯示肝癌組織中p16ink4a表達(dá)量顯著高于肝癌前病變的肝組織及肝癌旁組織的表達(dá)水平?;⒀廴f年青總皂苷作用組并不改變肝癌前病變期p16ink4a的水平,但肝癌發(fā)生進(jìn)展階段,提高p16ink4a表達(dá)水平。能否說明虎眼萬年青總皂苷能夠提高抑癌基因p16ink4a表達(dá)水平,抑制CDK4-cyclin D復(fù)合體的催化活性,抑制結(jié)合成全酶磷酸化Rb蛋白,待進(jìn)一步深入研究。
參考文獻(xiàn)
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【摘 要】目的:探討提高老年慢性呼吸衰竭患者治療效果的護(hù)理方法。方法:選取2013 年9 月至2014 年9 月來本院就診的老年慢性呼吸衰竭患者106 例,隨機將其均分為對照組和觀察兩組,以相同的治療方法進(jìn)行治療,對照組患者給予常規(guī)護(hù)理,觀察組此基礎(chǔ)上給予全面優(yōu)質(zhì)的護(hù)理。結(jié)果:觀察組患者經(jīng)全面優(yōu)質(zhì)的護(hù)理干預(yù)后,總有效為96.23%,明顯優(yōu)于對照組(84.91%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:全面優(yōu)質(zhì)的護(hù)理干預(yù)能老年慢性呼吸衰竭患者治療效果。
關(guān)鍵詞 慢性呼吸衰竭;老年;護(hù)理;效果
慢性呼吸衰竭是在原有肺部疾病基礎(chǔ)上發(fā)生的,如肺間質(zhì)性纖維化、重癥肺結(jié)核、慢性阻塞性肺病、塵肺等[1]。早期可表現(xiàn)為Ⅰ型呼吸衰竭,隨著病情逐漸加重,肺功能愈來愈差,可表現(xiàn)為Ⅱ型呼吸衰竭[2]。老年人由于身體機能及身體免疫力衰退,是慢性呼吸衰竭的易發(fā)群體[3]。老年慢性呼吸衰竭屬于內(nèi)科危重癥,病情復(fù)雜,難以根治,易復(fù)發(fā),死亡率高。因此,為延緩老年慢性呼吸衰竭的發(fā)展進(jìn)程,降低慢性呼吸衰竭的急性發(fā)作幾率及死亡率,做好臨床治療護(hù)理工作是很有必要的。本研究通過對2013 年9 月至2014 年9 月來本院就診的106 例老年慢性呼吸衰竭患者實施全面優(yōu)質(zhì)的護(hù)理干預(yù),取得較好的效果,現(xiàn)報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2013 年9 月至2014 年9 月來本院就診的老年慢性呼吸衰竭患者106 例,其中男62 例,女44 例,年齡61~83 歲,平均年齡75.8 歲。病程3~17 個月,平均9.6個月。隨機將106 例患者均分為兩組,對照組和觀察組各53 例,兩組患者在年齡、病程、原發(fā)病、性別、治療方法等資料上差異無統(tǒng)計學(xué)意義,具有可比性。判定標(biāo)準(zhǔn):治愈:呼吸道感染控制,肺性腦病癥狀消失,呼吸困難減輕, 吸氣時PaCO2 接近正常范圍,Pao2 ≥60mmHg;顯效:血氣測定值改善,臨床癥狀好轉(zhuǎn);無效:血氣值、癥狀、體征無改善或加重[4-7]??傆行? 痊愈率+顯效率。
1.2 方法
兩組患者以相同的治療方法進(jìn)行治療,均給予增加通氣量、保持呼吸道通暢、抗感染、減少CO2 潴留、病因治療、糾正酸堿平衡失調(diào)等。對照組患者給予常規(guī)護(hù)理,觀察組此基礎(chǔ)上給予全面優(yōu)質(zhì)的護(hù)理,具體如下。
1.2.1 密切監(jiān)測病情
嚴(yán)密觀察患者生命體征的變化。由于老年慢性呼吸衰竭患者的癥狀多不典型,但一發(fā)作就會產(chǎn)生嚴(yán)重后果,甚至危及生命,因此,應(yīng)密切觀察患者的病情變化,及時采取相應(yīng)的治療護(hù)理措施,防止病情加重。認(rèn)真觀察患者的呼吸狀況,若患者出現(xiàn)呼氣延長且粗,并伴有哮鳴音的提肩或點頭狀呼吸,表明患者呼吸困難。尤其是在患者睡覺時,護(hù)理人員應(yīng)加以注意。觀察患者有無發(fā)紺癥狀,發(fā)紺是缺氧的典型表現(xiàn)。同時密切觀察患者的意識狀況,若老年患者缺氧,患者的意識也會發(fā)生變化,出現(xiàn)答非所問、煩躁、昏迷、嗜睡、大小便失禁等意識障礙。
1.2.2 促進(jìn)排痰,保持呼吸道通暢
及時清理患者的呼吸道分泌物,鼓勵患者多喝水,鼓勵患者多做深呼吸、雙手按壓上腹,用力咳嗽,以利于痰液的排出。對于臥床的患者,可通過改變來使分泌物移動至支氣管,促進(jìn)排痰。若患者咳嗽無力,應(yīng)采用慶大霉素8U+20mL0.9%生理鹽水+5mg 糜蛋白酶霧化吸入,2 次/d。必要時,可進(jìn)行人工通氣。
1.2.3 合理給氧
嚴(yán)格遵守吸氧恒定、調(diào)控原則。不間斷持續(xù)吸氧,低流量(1~1.5L/min),低濃度(<30%)控制給氧。積極與患者溝通,讓患者知道正確給氧的重要性,爭取患者的積極配合。
1.2.4 心理護(hù)理
護(hù)理人員在進(jìn)行各項操作時應(yīng)動作輕柔,態(tài)度溫和,積極與患者溝通交流。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
采用spss14.0 對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗,P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
兩組經(jīng)護(hù)理干預(yù)后的療效對比。見表1。
3 小結(jié)
給予老年慢性呼吸道患者全面優(yōu)質(zhì)的護(hù)理服務(wù),以患者為中心,提高患者的滿意度,對提高老年慢性呼吸衰竭患者治療效果是很有幫助的。
參考文獻(xiàn)
[1] 周舫. 老年重癥慢性呼吸衰竭的護(hù)理干預(yù)[J]. 中國醫(yī)藥指南,2013,7(23):293-294.
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